Apresentação
O Microscópio Eletrônico de Transmissão (MET) é um microscópio no qual um feixe de elétrons é emitido em direção a uma amostra ultra fina, interagindo com a amostra enquanto a atravessa. A interação dos elétrons transmitidos através da amostra forma uma imagem que é ampliada e focada em um dispositivo de imagem, como uma tela fluorescente em uma camada de filme fotográfico, ou detectada por um sensor como uma câmera CCD. Um MET é capaz de exibir imagens a uma resolução significativamente maior em comparação com os microscópios de luz convencionais devido ao pequeno comprimento de onda dos elétrons. Tal característica permite ao usuário examinar detalhes ínfimos, até mesmo uma simples coluna de átomos, a qual é dezenas de milhares vezes menor do que o menor objeto reconhecível em um microscópio de luz.

Descrição
Microscópio Eletrônico de Transmissão Carl Zeiss EM 900
Voltagem: 50 KV a 80 KV
Ampliação: 150X a 250.000X
Resolução Máxima: 0,5 nm

Aplicações
Análise de cortes ultrafinos de material biológico

Procedimentos
O equipamento destina-se apenas à observação e registro de dados de morfologia ultraestrutural de material biológico já processado e montado em telas--suporte. Os procedimentos de preparação prévia do material (fixação, inclusão, ultramicrotomia, etc.) são de responsabilidade do pesquisador.

Apresentação
O Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) é capaz de produzir imagens de alta resolução da superfície de uma amostra, no caso específico, de material biológico. Devido à maneira com que as imagens são criadas, imagens de MEV têm uma aparência tridimensional característica e são úteis para avaliar a estrutura superficial da amostra.

Descrição
Microscópio Eletrônico de Varredura Zeiss DSM940
Voltagem: 1 KV a 30 KV
Ampliação: 15X a 200.000X
Resolução Máxima: 5 nm

Aplicações
Geração de imagens em alta resolução da superfície de amostras biológicas. Devido à maneira com que as imagens são criadas, imagens de MEV têm uma aparência tridimensional característica e são importantes para avaliar a estrutura superficial fina do objeto. É particularmente útil na descrição de detalhes anatômicos como, por exemplo, os de carácter sistemático.

Procedimentos
O equipamento destina-se apenas à observação e registro de dados de morfologia ultraestrutural de material biológico já processado e montado em "stubs" adequados. Os procedimentos de preparação prévia do material para estudo (fixação, montagem, metalização, etc.) são de responsabilidade do pesquisador.

Apresentação
O Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) é capaz de produzir imagens de alta resolução da superfície de uma amostra, no caso específico, de material biológico. Devido à maneira com que as imagens são criadas, imagens de MEV têm uma aparência tridimensional característica e são úteis para avaliar a estrutura superficial da amostra.

Descrição
Microscópio de Varredura SIGMA VP (Pressão Variável)
Voltagem: 0,1 KV a 30 KV
Ampliação: 12X a 1.000.000X
Resolução Máxima: 1,3 nm

Aplicações
Geração de imagens em alta resolução da superfície de amostras biológicas. Devido à maneira com que as imagens são criadas, imagens de MEV têm uma aparência tridimensional característica e são importantes para avaliar a estrutura superficial fina do objeto. É particularmente útil na descrição de detalhes anatômicos como, por exemplo, os de carácter sistemático.

Procedimentos
O equipamento destina-se apenas à observação e registro de dados de morfologia ultraestrutural de material biológico já processado e montado em "stubs" adequados. Os procedimentos de preparação prévia do material para estudo (fixação, montagem, metalização, etc.) são de responsabilidade do pesquisador.

Apresentação
O microscopio confocal de varredura a laser permite a obtenção de imagens de fluorescência em alta resolução através de cortes ópticos que podem ser posteriormente agrupados para se fazer uma reconstrução tridimensional da topografia de objetos complexos. A microscopia confocal possibilita a observação funcional de células e tecidos.

Descrição
O microscópio Confocal Zeiss LSM 880 possui sistema de iluminação com sete linhas de laser (405, 458, 488, 514, 543, 594 e 633 nm), três canais de detecção espectral GaAsP (Gallium Arsenide Phosphid) ultrassensíveis, além de plataforma para microscopia de correlação com microscópio eletrônico de varredura. O sistema apresenta um escaneamento mais rápido, podendo registrar até 13 quadros por segundo e permitindo, por exemplo, a observação de movimentos de proteínas marcadas na dinâmica celular.
O sistema é capaz de gerar imagens com até quatro fluoróforos distintos e obter excelente escaneamento mesmo em amostras espessas, sendo recomendado, em geral, um limite de 200 micrômetros. Em casos especiais, espessuras maiores podem ser atingidas dependendo dos parâmetros adotados.
Esse microscópio é do tipo invertido e está adaptado para examinar amostras fixadas ou vivas em lâminas de vidro. A análise do material e obtenção de imagens ocorrerá sempre através de um técnico do CAIMi.

Aplicações
Detecção de fluoróforos com reconstrução tridimensional de células e tecidos.

Procedimentos
O pesquisador deverá trazer as amostras (lâminas) pré-montadas para observação ao microscópio, com um controle prévio em microscópio de fluorescência convencional para atestar a qualidade das preparações antes da sessão.

Apresentação
O microscopio confocal de varredura a laser permite a obtenção de imagens de fluorescência em alta resolução através de cortes ópticos que podem ser posteriormente agrupados para se fazer uma reconstrução tridimensional da topografia de objetos complexos. A microscopia confocal possibilita a observação funcional de células e tecidos.

Descrição
Em contraste com a microscopia de fluorescencia tradicional em que toda a amostra é inundada uniformemente com luz, a microscopia confocal captura várias imagens bidimensionais em diferentes profundidades em uma amostra e permite a reconstrução de estruturas tridimensionais (um processo conhecido como corte óptico) com uma melhor resolução óptica da imagem. O microscópio confocal usa iluminação pontual e um orifício em um plano opticamente conjugado na frente do detector para eliminar o sinal fora de foco - o nome "confocal" deriva desta configuração. Esta técnica se usa em ciências da vida, inspeção de semicondutores e ciência de materiais.
O Leica TCS SPE é o único sistema confocal em sua classe com detecção espectral verdadeira. É baseado em um prisma que espalha a luz em seu espectro e um detector que serve para selecionar a faixa de detecção espectral. Assim, o sistema permite detecção espectral ajustável entre 430-750 nm.

Aplicações
Detecção de fluoróforos com reconstrução tridimensional de células e tecidos.

Procedimentos
O pesquisador deverá trazer as amostras (lâminas) pré-montadas para observação ao microscópio, com um controle prévio em microscópio de fluorescência convencional para atestar a qualidade das preparações antes da sessão.

Apresentação
O microscopio confocal de varredura a laser permite a obtenção de imagens de fluorescência em altíssima resolução através de cortes ópticos que podem ser posteriormente agrupados para se fazer uma reconstrução tridimensional da topografia de objetos complexos. A microscopia confocal possibilita a observação funcional de células e tecidos.

Descrição
O microscópio confocal Leica TCS SP8 é do tipo invertido e está adaptado para examinar amostras fixadas ou vivas em lâminas ou em placas de Petri com fundo de lamínula. Esse equipamento apresenta quatro detectores, sendo dois deles Detectores Híbridos, que essencialmente combinam as seguintes vantagens: são mais rápidos, produzem muito pouco ruído e oferecem alto alcance dinâmico. A fonte luminosa do Leica TCS SP8 é composta pelo sistema "White Light laser", que é constituído por uma fibra infravermelho, que produz um laser pulsado de alta energia de espectro continuo. Esse sistema permite o ajuste contínuo da cor do espectro do azul ao vermelho, com a vantagem de ser uma emissão de energia pulsada. Adicionalmente, o Leica TCS SP8 apresenta em sua plataforma a tecnologia de super resolução STED (STimulated Emission Depletion). A tecnologia STED oferece acesso rápido e direto a detalhes estruturais em nanoescala, através da melhora substancial da resolução lateral abaixo dos 50 nm. Maiores informações sobre a tecnologia STED podem ser obtidas em: https://www.leica-microsystems.com/science-lab/the-guide-to-sted-sample-preparation/ .

Aplicações
Detecção de fluoróforos em alta resolução com reconstrução tridimensional de células e tecidos.

Procedimentos
O pesquisador deverá trazer as amostras (lâminas) pré-montadas para observação ao microscópio, com um controle prévio em microscópio de fluorescência convencional para atestar a qualidade das preparações antes da sessão.

Apresentação
Equipamento que permite isolar células específicas de interesse de regiões microscópicas de tecido/células/organismos com a ajuda de um feixe de laser. No sistema PALM CombiSystem o objeto é marcado na tela e o laser é acionado para separá-lo do resto da preparação. Um pulso de laser direcionado 'catapulta' o objeto para cima transferindo-o para um recipiente de coleta para análise posterior. O sistema manipula partículas com alta precisão a nível celular e subcelular. Isso permite que o pesquisador mova e posicione objetos microscópicos - como células de tecidos ou bactérias - com a força do feixe de laser.

Descrição
Equipamento que permite isolar células específicas de interesse de regiões microscópicas de tecido/células/organismos com a ajuda de um feixe de laser. No sistema PALM CombiSystem o objeto é marcado na tela e o laser é acionado para separá-lo do resto da preparação. Um pulso de laser direcionado 'catapulta' o objeto para cima transferindo-o para um recipiente de coleta para análise posterior. O sistema manipula partículas com alta precisão a nível celular e subcelular. Isso permite que o pesquisador mova e posicione objetos microscópicos - como células de tecidos ou bactérias - com a força do feixe de laser.

Aplicações
No isolamento pontual e de alta precisão de células (ou outros objetos) em preparações biológicas para serem posteriormente estudadas.

Procedimentos
N/A

Apresentação
O Microtomógrafo de raios-X SkyScan 1176 é um sistema de microtomografia computadorizada de alta resolução e é utilizado para estudos morfológicos de diversos materiais biológicos.

Descrição
O Microtomógrafo de raios-X SkyScan 1176 é um sistema de microtomografia computadorizada de alta resolução e é utilizado para diversos materiais como biomateriais, algas calcarias, fósseis, répteis, anfíbios, aves pequenas, dentes, pequenos ossos ex vivo e in vivo e animais de pequeno porte (ratos e camundongos) com monitoração fisiológica integrada. A resolução pode ser observada em três diferentes tamanhos: 9, 18 ou 35µm. A voltagem se aplica entre 20 e 90 Kv.

Aplicações
Em especial para estudos anatômicos de alta resolução.

Procedimentos
O procedimento para preparo da amostra para análise ao microtomógrafo depende do tipo de material a ser estudado.

Apresentação
Sistema reúne citometria de fluxo e análise quantitativa de imagem.
Permite analisar a expressão de receptores e moléculas na membrana celular, a translocação de fatores de transcrição ou proteínas de membrana, internalização de proteínas e partículas, morfologia nuclear, medir trafego de organelas nas células, co-localização de organelas ou proteínas no núcleo ou citoplasma celular, interações célula-célula, ciclo celular, morte celular ou autofagia.

Descrição
Sistema reúne citometria de fluxo e análise quantitativa de imagem.
Configuração do equipamento: laser de excitação de 488 nm e canal de campo claro permite leitura simultânea em 4 canais de detecção de fluorescência e dois canais campo claro. Aumento de 20x e captação digital de uma área de 2μm. Ver brochura anexa (FlowSight brochura).

Aplicações
Permite analisar a expressão de receptores e moléculas na membrana celular, a translocação de fatores de transcrição ou proteínas de membrana, internalização de proteínas e partículas, morfologia nuclear, medir trafego de organelas nas células, co-localização de organelas ou proteínas no núcleo ou citoplasma celular, interações célula-célula, ciclo celular, morte celular ou autofagia.

Procedimentos
Entrar em contato com a docente responsável pelo uso Dra. Zulma Felisbina da Silva Ferreira
e-mail: zulmafer@usp.br tel. (11)3091-8076

Apresentação
Metalizador rotativo para revestimento metálico de amostras para microscopia eletrônica de varredura, utilizando "targets" de ouro ou ouro/paládio).

Descrição
Metalizador rotativo para revestimento metálico de amostras para microscopia eletrônica de varredura, utilizando "targets" de ouro ou ouro/paládio).

Aplicações
Revestimento metálico (ouro ou ouro/paládio) de amostras biológicas para observação ao microscópio eletrônico de varredura para tornar as superfícies condutoras de elétrons, evitando a formação de cargas que afetam a qualidade da imagem.

Procedimentos
A metalização de amostras, já montadas em "stubs" adequados, serão metalizadas em lotes de 10 amostras por vez, com agendamento prévio.

Apresentação
Metalizador rotativo para revestimento metálico de amostras para microscopia eletrônica de varredura, utilizando "targets" de ouro ou ouro/paládio).

Descrição
Metalizador rotativo para revestimento metálico de amostras para microscopia eletrônica de varredura, utilizando "targets" de ouro ou ouro/paládio).

Aplicações
Revestimento metálico (ouro ou ouro/paládio) de amostras biológicas para observação ao microscópio eletrônico de varredura para tornar as superfícies condutoras de elétrons, evitando a formação de cargas que afetam a qualidade da imagem.

Procedimentos
A metalização de amostras, já montadas em "stubs" adequados, serão metalizadas em lotes de 10 amostras por vez, com agendamento prévio.

Apresentação
Unidade de secagem de amostras biológicas em ponto crítico de CO2 para observação em microscopia eletrônica de varredura.

Descrição
Unidade de secagem de amostras biológicas em ponto crítico de CO2 para posterior observação ao microscópio eletrônico de varredura.

Aplicações
A utilização desta unidade permite uma desidratação intensa da amostra a ser observada ao microscópio eletrônico de varredura, sem que sejam produzidos artefatos causados por uma secagem natural no ambiente.

Procedimentos
O material a ser desidratado nesta unidade deve estar previamente fixado e desidratado em álcool absoluto ou acetona e estar totalmente imerso neste últimos.